在日常工作中，醫(yī)護人員都會按照國家衛(wèi)健委的要求，做好正確的生物安全防護，但是由于防護資源有限或者實驗室現(xiàn)實條件限制，大家還是普遍存在擔心。流式處理樣本中，最容易發(fā)生生物安全的階段是離心，因為流式管是開口無蓋的，樣本轉移或處理時、樣本離心時，均易產(chǎn)生污染事件，因為樣本沒能像病理標本那樣固定過，所以這些過程中產(chǎn)生的污染是存在感染能力的。

由于新型冠狀病毒沒有特效藥，患者最后都是需要在對癥支持下，完全依靠自身的免疫系統(tǒng)對抗病毒，實現(xiàn)類似感冒一樣進行自愈，所以在北京協(xié)和診療方案將淋巴亞群和細胞因子也納入到了新型冠狀病毒感染患者的檢測指標中，這樣一來，流式就責無旁貸地參與到了新型冠狀病毒患者的治療中來了。

但如此一來，也給流式樣本處理帶來了生物安全隱患，所以很多做流式的伙伴們十分擔心。昨天有臨床流式的朋友向我咨詢了樣本處理安全措施，提出三點：實驗室生物安全級別的硬件條件至少II級（最好III級）、自身防護服、生物安全柜。但實際上，在1月23日，國家衛(wèi)健委就已經(jīng)出臺了較為詳細的實驗室生物安全指南，在此轉載，供奮戰(zhàn)在臨床流式一線的朋友參考。

根據(jù)目前掌握的新型冠狀病毒生物學特點、流行病學特征、致病性、臨床表現(xiàn)等信息，該病原體暫按照病原微生物危害程度分類中第二類病原微生物進行管理。

一、實驗活動生物安全要求

（一）病毒培養(yǎng)：指病毒的分離、培養(yǎng)、滴定、中和試驗、活病毒及其蛋白純化、病毒凍干以及產(chǎn)生活病毒的重組實驗等操作。上述操作應當在生物安全三級實驗室內(nèi)進行。使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與病毒培養(yǎng)等同級別的實驗室和防護條件下進行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的防護等級進行操作。實驗室開展相關活動前，應當報經(jīng)國家衛(wèi)生健康委批準，取得開展相應活動的資質。

（二）動物感染實驗：指以活病毒感染動物、感染動物取樣、感染性樣本處理和檢測、感染動物特殊檢查、感染動物排泄物處理等實驗操作，應當在生物安全三級實驗室操作。實驗室開展相關活動前，應當報經(jīng)國家衛(wèi)生健康委批準，取得開展相應活動的資質。

（三）未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作：指未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料在采用可靠的方法滅活前進行的病毒抗原檢測、血清學檢測、核酸提取、生化分析，以及臨床樣本的滅活等操作，應當在生物安全二級實驗室進行，同時采用生物安全三級實驗室的個人防護。

（四）滅活材料的操作：感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進行的核酸檢測、抗原檢測、血清學檢測、生化分析等操作應當在生物安全二級實驗室進行。分子克隆等不含致病性活病毒的其他操作，可以在生物安全一級實驗室進行。

二、病原體及樣本運輸和管理??????????????????????

（一）國內(nèi)運輸：新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性生物材料的運輸包裝分類屬于A類，對應的聯(lián)合國編號為UN2814，包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術細則》的PI602分類包裝要求；環(huán)境樣本屬于B類，對應的聯(lián)合國編號為UN3373，包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術細則》的PI650分類包裝要求；通過其他交通工具運輸?shù)目蓞⒄找陨蠘藴拾b。

新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料運輸應當按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)生部令第45號）辦理《準運證書》。

（二）國際運輸：新型冠狀病毒毒株或樣本在國際間運輸?shù)?#xff0c;應當規(guī)范包裝，按照《出入境特殊物品衛(wèi)生檢疫管理規(guī)定》辦理相關手續(xù)，并滿足相關國家和國際相關要求。

（三）毒株和樣本管理：新型冠狀病毒毒株和相關樣本應當由專人管理，準確記錄毒株和樣本的來源、種類、數(shù)量、編號登記，采取有效措施確保毒株和樣本的安全，嚴防發(fā)生誤用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、泄露等事件。

三、廢棄物管理

（一）開展新型冠狀病毒相關實驗活動的實驗室應當制定廢棄物處置程序文件及污物、污水處理操作程序。

（二）所有的危險性廢棄物必須依照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標示方式，完整并且合規(guī)地標示廢棄物內(nèi)容。

（三）應當由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備和設備處理危險廢棄物。

（四）廢棄物的處理措施：廢棄物的處理是控制實驗室生物安全的關鍵環(huán)節(jié)，切實安全地處理感染性廢棄物，必須充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴格執(zhí)行相應的處理程序。

1.廢液的處理：實驗室產(chǎn)生的廢液可分為普通污水和感染性廢液。

（1）普通污水產(chǎn)生于洗手池等設備，對此類污水應當單獨收集，排入實驗室水處理系統(tǒng)，經(jīng)處理達標后方可排放。

（2）感染性廢液即在實驗操作過程中產(chǎn)生的廢水，采用化學消毒或物理消毒方式處理，并對消毒效果進行驗證，確保徹底滅活。

（3）工作人員應當及時處理廢棄物，不得將廢棄物帶出實驗區(qū)。

2.固體廢物的處理：

（1）固體廢物分類收集，固體廢物的收集容器應當具有不易破裂、防滲漏、耐濕耐熱、可密封等特性。實驗室內(nèi)的感染性垃圾不允許堆積存放，應當及時壓力蒸汽滅菌處理。廢物處置之前，應當存放在實驗室內(nèi)指定的安全地方。

（2）小型固體廢物如組織標本、耗材、個人防護裝備等均需經(jīng)過壓力蒸汽滅菌處理，再沿廢棄物通道移出實驗室。

（3）體積較大的固體廢物如HEPA過濾器，應當由專業(yè)人士進行原位消毒后，裝入安全容器內(nèi)進行消毒滅菌。不能進行壓力蒸汽滅菌的物品如電子設備可以采用環(huán)氧乙烷熏蒸消毒處理。

（4）經(jīng)消毒滅菌處理后移出實驗室的固體廢物，集中交由固體廢物處理單位處置。

（5）實驗過程如使用銳器（包括針頭、小刀、金屬和玻璃等）要直接棄置于銳器盒內(nèi)，高壓滅菌后，再做統(tǒng)一處理。

（五）建立廢棄物處理記錄：定期對實驗室排風HEPA過濾器進行檢漏和更換，定期對處理后的污水進行監(jiān)測，采用生物指示劑監(jiān)測壓力蒸汽滅菌效果。

四、實驗室生物安全操作失誤或意外的處理

（一）新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料污染生物安全柜的操作臺造成局限污染：使用有效氯含量為0.55%消毒液，消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時內(nèi)使用。此后內(nèi)容中有效氯含量參照此濃度。

（二）含病毒培養(yǎng)器皿碎裂或傾覆造成實驗室污染：保持實驗室空間密閉，避免污染物擴散，使用0.55%有效氯消毒液的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(大量溢撒時)可用過氧乙酸加熱熏蒸實驗室，劑量為2g/m3，熏蒸過夜；或20g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m3，作用1～2小時；必要時或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m3，熏蒸4小時以上。熏蒸時室內(nèi)濕度60%-80%。

（三）清理污染物嚴格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進行實驗室換氣等，防止次生危害。

雖然是疫情的蔓延讓實驗室更加注重污染物管理，但在日常實驗室管理一定也要提高安全警覺！